IPTG CAS:367-93-1 Giá nhà sản xuất
Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) là một chất tương tự tổng hợp của lactose thường được sử dụng trong nghiên cứu sinh học phân tử và ứng dụng công nghệ sinh học.IPTG chủ yếu được sử dụng để tạo ra sự biểu hiện gen trong hệ thống vi khuẩn, nơi nó đóng vai trò là chất kích hoạt phân tử để bắt đầu phiên mã các gen mục tiêu.
Khi được thêm vào môi trường tăng trưởng, IPTG được vi khuẩn hấp thụ và có thể liên kết với protein ức chế lac, ngăn không cho nó ngăn chặn hoạt động của operon lac.Operon lac là một cụm gen tham gia vào quá trình chuyển hóa đường sữa và khi loại bỏ protein ức chế thì các gen đó sẽ được biểu hiện.
IPTG thường được sử dụng kết hợp với trình khởi động đột biến lacUV5, đây là phiên bản hoạt động cấu thành của trình khởi động lac.Bằng cách kết hợp cảm ứng IPTG với chất kích thích đột biến này, các nhà nghiên cứu có thể đạt được mức độ biểu hiện gen cao.Điều này cho phép sản xuất số lượng lớn protein để tinh chế hoặc các ứng dụng tiếp theo khác.
Ngoài biểu hiện gen, IPTG còn thường xuyên được sử dụng trong các xét nghiệm sàng lọc xanh/trắng.Trong kỹ thuật này, gen lacZ thường được kết hợp với gen quan tâm và vi khuẩn biểu hiện thành công gen tổng hợp này sẽ tạo ra enzyme β-galactosidase hoạt động.Khi IPTG được thêm vào cùng với chất nền tạo màu như X-gal, vi khuẩn biểu hiện gen tổng hợp sẽ chuyển sang màu xanh lam do hoạt động của β-galactosidase.Điều này cho phép xác định và lựa chọn các chủng tái tổ hợp đã tích hợp thành công gen quan tâm.
Cảm ứng biểu hiện gen: IPTG thường được sử dụng để tạo ra sự biểu hiện gen mục tiêu trong hệ thống vi khuẩn.Nó bắt chước chất cảm ứng tự nhiên lactose và liên kết với protein ức chế lac, ngăn chặn nó ngăn chặn operon lac.Điều này cho phép phiên mã và biểu hiện các gen mong muốn.
Biểu hiện và tinh chế protein: Cảm ứng IPTG thường được sử dụng để sản xuất số lượng lớn protein tái tổ hợp cho nhiều mục đích khác nhau, chẳng hạn như nghiên cứu sinh hóa, sản xuất trị liệu hoặc phân tích cấu trúc.Bằng cách sử dụng các vectơ biểu hiện thích hợp và cảm ứng IPTG, các nhà nghiên cứu có thể đạt được mức sản xuất protein mục tiêu cao ở vật chủ vi khuẩn.
Sàng lọc xanh/trắng: IPTG thường được sử dụng kết hợp với gen lacZ và chất nền tạo màu, chẳng hạn như X-gal, để xét nghiệm sàng lọc xanh/trắng.Gen lacZ thường được kết hợp với gen quan tâm và vi khuẩn biểu hiện thành công gen kết hợp này sẽ tạo ra enzyme β-galactosidase hoạt động.Khi IPTG và chất nền tạo màu được thêm vào, các chủng tái tổ hợp biểu hiện gen dung hợp sẽ chuyển sang màu xanh lam, cho phép dễ dàng nhận dạng và lựa chọn.
Nghiên cứu sự điều hòa gen: Cảm ứng IPTG được sử dụng phổ biến trong nghiên cứu nghiên cứu sự điều hòa gen và operon, đặc biệt là operon lac.Bằng cách điều chỉnh nồng độ IPTG và theo dõi sự biểu hiện của các thành phần operon lac, các nhà nghiên cứu có thể nghiên cứu cơ chế điều hòa gen và vai trò của các yếu tố hoặc đột biến khác nhau.
Hệ thống biểu hiện gen: IPTG là thành phần quan trọng trong một số hệ thống biểu hiện gen, chẳng hạn như hệ thống dựa trên trình khởi động T7.Trong các hệ thống này, chất khởi động lac thường được sử dụng để điều khiển sự biểu hiện của T7 RNA polymerase, từ đó phiên mã các gen mục tiêu dưới sự kiểm soát của trình tự khởi đầu T7.IPTG được sử dụng để tạo ra sự biểu hiện của T7 RNA polymerase, dẫn đến việc kích hoạt biểu hiện gen mục tiêu.
Thành phần | C9H18O5S |
xét nghiệm | 99% |
Vẻ bề ngoài | bột trắng |
Số CAS | 367-93-1 |
đóng gói | Nhỏ và số lượng lớn |
Hạn sử dụng | 2 năm |
Kho | Bảo quản ở nơi khô ráo và thoáng mát |
Chứng nhận | ISO. |