4-Nitrophenyl beta-D-galactopyranoside CAS: 200422-18-0

Tác dụng: ONPG là chất nền chuyên dùng để phát hiện sự hiện diện và hoạt động của enzyme β-galactosidase.Khi enzyme β-galactosidase có mặt và hoạt động, nó sẽ tách ONPG thành hai sản phẩm: o-nitrophenol và một dẫn xuất galactose.Sự giải phóng o-nitrophenol dẫn đến sự thay đổi màu vàng, có thể đo được bằng máy đo quang phổ.

Ứng dụng: ONPG có một số ứng dụng trong nghiên cứu sinh học phân tử và hóa sinh:

Xác định hoạt tính β-galactosidase: ONPG thường được sử dụng để đo và định lượng hoạt tính của enzyme β-galactosidase.Tốc độ hình thành o-nitrophenol, tỷ lệ thuận với hoạt động của enzyme, có thể được đo bằng phương pháp đo quang phổ.

Biểu hiện và điều hòa gen: ONPG thường được sử dụng trong các thí nghiệm liên quan đến nghiên cứu điều hòa và biểu hiện gen.Nó thường được sử dụng trong các thử nghiệm protein tổng hợp, chẳng hạn như hệ thống tổng hợp lacZ thường được sử dụng, để nghiên cứu sự biểu hiện của gen dưới sự kiểm soát của các chất xúc tiến cụ thể.Hoạt tính beta-galactosidase được đo bằng ONPG cung cấp cái nhìn sâu sắc về mức độ biểu hiện gen.

Sàng lọc hoạt động β-galactosidase: ONPG có thể được sử dụng làm phương pháp sàng lọc đo màu trong công nghệ DNA tái tổ hợp để xác định sự hiện diện và chức năng của gen LacZ mã hóa β-galactosidase.Phương pháp sàng lọc này giúp xác định các dòng vô tính có chứa gen quan tâm.

Nghiên cứu động học enzyme: ONPG cũng hữu ích trong việc nghiên cứu động học của enzyme β-galactosidase.Bằng cách đo tốc độ phản ứng enzyme-cơ chất ở các nồng độ cơ chất khác nhau, có thể xác định các thông số động học như hằng số Michaelis-Menten (Km) và tốc độ phản ứng tối đa (Vmax).